In questo studio è stato sviluppato un test PCR-enzyme-linked immunosorbent assay (PCR-ELISA) per la rivelazione e quantificazione di Cronobacter spp. in latte formula per l’infanzia (PIF). Il metodo impiega primer marcati con digossigenina e biotina specifici per il gene rpoB, e i prodotti PCR sono stati rivelati mediante test ELISA con anticorpi antidigossigenina.
La specificità del saggio PCR-ELISA è stata valutata su 39 ceppi, inclusi 19 ceppi di Cronobacter spp. Dopo 25 cicli di amplificazione, il saggio PCR-ELISA ha dimostrato una buona correlazione lineare tra numeri di cellule e valori PCR-ELISA. La sensibilità del saggio è stata 1,06×102 e 1,06×103 ufc/ml per colture pure e PIF senza arricchimento, rispettivamente.
Quando il sistema PCR-ELISA è stato applicato a PIF, i ricercatori sono riusciti a rivelare fino a 100 ufc/ml di C. sakazakii dopo 10 ore di arricchimento. Il saggio PCRELISA è quindi risultato un metodo sensibile e accurato per la rapida ricerca e quantificazione di Cronobacter spp. in PIF.
Bibliografia
Yuanhong Li et al. College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University (Cina); International dairy journal, ediz. online 1 luglio 2013. In stampa http://dx.doi.org/10.1016/j.idairyj.2013.06.009
